Mcherry-gfp-lc3b质粒
Web28 mrt. 2024 · 为什么大家都用gfp-lc3去转染细胞，可是这样应该是外源性的表达啊，真的能反应细胞本身的自噬状态吗？为什么没有人用免疫荧光的方法检测lc3呢，而且免疫荧光的方法自认为好像比转染要容易些吧，特别是lamp与lc3共定位的时候，免疫荧光是必然能用到的实验方法，所以为什么一定要转染呢？ Web2 jun. 2011 · A tandem fusion of mCherry and GFP is fused to LC3B (one of the several members of the mammalian LC3 family) to make a pH-sensitive sensor that is used to monitor autophagy in live cells. The GFP tag is acid-sensitive while the …
Mcherry-gfp-lc3b质粒
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WebmCherry-GFP-LC3B腺相关病毒 四．自噬双标系统的工作原理 未发生自噬的细胞及含有自噬体的细胞中，由于mCherry与GFP共同表达，细胞呈现黄色荧光。 当自噬体与溶酶体融合 形成自噬溶酶体后，酸性的溶酶体环境使酸敏感的GFP荧光淬灭，而mCherry不受影响，进而使自噬溶酶体呈现红色荧 光。 因此，红色荧光可指示自噬溶酶体形成的顺利程度。 红 … WebmCherry与GFP没有序列同源性，不能使用GFP抗体检测mCherry。 该质粒为卡那霉素抗性。 转染细胞后，可以使用G418筛选稳定表达目的蛋白的细胞株。 本质粒质粒的主要信息如下： 本质粒 (4994bp)的图谱如下： 使用说明： 1.首次使用时请先取少量本质粒转化大肠杆菌，进行质粒小量、中量或大量抽提后再用于后续用途。 抽提获得的质粒可以通过酶切电 …
Web9 nov. 2015 · pmCherry-GFP-LC3 细胞自噬检测载体红色绿色双荧光报告质粒。 CMV 启动子 +mCherry+EGFP+LC3B ， Knan 抗性， G418 细胞筛选标记。 Transformation of plasmid DNA to competent E. Coli cells. Thaw competent cells on ice. 20–200µL per tube ; Add max. 1-3µL of plasmid ; Mix very gently! Incubate the tubes on ice for 30 min Web8 jan. 2016 · 转染mRFP/mCherry-GFP-LC3B的细胞除利用免疫荧光显微镜观察细胞内荧光分布外, 还可以通过流式细胞术对其进行分选。利用分选软件将每个细胞内mRFP或mCherry的发射光强度与GFP发射光强度进行比值处理, 比值高的细胞代表高自噬流活性; 比值低的细胞代表低自噬流活性 ...
Web29 sep. 2024 · 因此若细胞内出现绿和红色荧光共定位，即出现黄色荧光时，表明：mCherry-eGFP-LC3B 融合蛋白并未与溶酶体发生融合, 说明了自噬流被阻断。当细胞内仅出现红色荧光而无绿色荧光时，代表 mCherry-eGFP-LC3B 融合蛋白定位于溶酶体或自噬溶酶体内，即自噬流活化。 WebLC3B可从细胞质基质中获得，并与早期自噬过程中的吞噬泡形成有关。 这种定位信息可作为自噬膜的常用标记，还可监控其发展变化的过程。 Molecular Probes工具可进行： 活细胞及固定细胞中的自噬追踪及定位 对含LC3B的囊泡进行实时pH监控 定量分析LC3B的聚积 查看LC3B聚积检测产品选择指南 使用 Premo™ Autophagy Sensor LC3B-RFP （红色）及 …
WebpCMV-mCherry-GFP-LC3B是碧云天研发的在哺乳动物细胞中表达红色mCherry和绿色GFP双标签的人源LC3B融合蛋白的质粒。 该质粒含有CMV启动子，为卡那霉素抗性，转染后能够在靶细胞中高效表达带有红色荧光蛋白mCherry和绿色荧光蛋白GFP双重标签的LC3B的融合蛋白，呈现明亮的
http://www.wzbio.com.cn/special.php?cid=44 discount fencing hirehttp://img1.bioon.com/news/showarticle.asp?newsid=98676 four star delivery expressWeb18 mrt. 2024 · 除Western blot 外, LC3B 蛋白还可以GFP-LC3B等融合蛋白形式通过免疫荧光和流式细胞术等方法进行检测。这两种检测均需要使用荧光染料或荧光蛋白进行标记。免疫荧光的优势是可以观察到LC3B的点状聚集, 而流式细胞术则可以分析大量单细胞内LC3B 的表 … discount feminine productsWebGFP-LC3单荧光和mCherry-GFP-LC3双荧光指示系统. 自噬形成时，GFP-LC3或mCherry-GFP-LC3融合蛋白转移至自噬体膜，在荧光显微镜下形成多个明亮的绿色或黄色荧光斑点。当自噬溶酶体形成后，酸性环境使GFP荧光淬灭，而mCherry荧光不受影响，自噬溶酶体呈现红色荧光（图7）。 discount fence supply inc ohioWebGreen fluorescent protein (GFP)-LC3B adenovirus, GFP-red fluorescent protein (RFP)-LC3B adenovirus and mCherry-EGFP-LC3 adeno-associated virus were obtained from Hanbio (Shanghai, China). Cell Culture. The human HSC cell line LX-2 (Procell, Wuhan, China) was cultured in DMEM supplemented with 10% FBS at 37 °C and 5% CO 2. discount fences onlineWebpCDH-EF1a-mCherry-EGFP-LC3B was a gift from Sang-Hun Lee (Addgene plasmid # 170446 ; http://n2t.net/addgene:170446 ; RRID:Addgene_170446) Neurodevelopmental defects and neurodegenerative phenotypes in human brain organoids carrying Parkinson's disease-linked DNAJC6 mutations. four star drywall pensacola flWebAd-mCherry-GFP-LC3B是重组腺病毒，感染后能够在靶细胞中有效表达红色荧光蛋白mCherry、绿色荧光蛋白 (GFP)和LC3B的融合蛋白，呈现明亮的红色和绿色荧光，可以用于细胞自噬的检测。 自噬小体在与溶酶体融合过程中，溶酶体内的酸性环境会导致GFP荧光淬灭，这为追踪GFP-LC3B的细胞定位增加了难度。 mCherry是一种来自于蘑菇珊瑚 … four star drywall